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藥典委“細(xì)菌 DNA 特征序列鑒定法”征求意見稿解析及儀器配置方案

發(fā)布時間:2018-12-10

瀏覽次數(shù):2710

2020版中國藥典》新增指導(dǎo)通則細(xì)菌 DNA 特征序列鑒定法(征求意見稿解析與儀器配置方案

 

 

  • 指導(dǎo)通則信息
  1. 指導(dǎo)通則號:尚未公布
  2. 指導(dǎo)通則名稱:細(xì)菌 DNA 特征序列鑒定法
  3. 征求意見稿發(fā)布時間:2018823
  4. 公示單位:國家藥典委員會

 

  • 檢測項目解析

    指導(dǎo)通則前言:細(xì)菌DNA特征序列鑒定法系以特征核酸序列作為目標(biāo)檢測物,

用于藥用原料、輔料、制藥用水、中間產(chǎn)品、終產(chǎn)品(制劑)、包裝材料和環(huán)境等藥

品全生命周期質(zhì)量控制中細(xì)菌的鑒定。

 

    指導(dǎo)通則正文待檢菌測定部分,共涉及七個流程:分離純化、核酸提取、核酸

擴(kuò)增、核酸擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測、核酸擴(kuò)增產(chǎn)物的純化、核酸測序、結(jié)果判定。其中,

核酸提取環(huán)節(jié)質(zhì)量測定部分,提出要求如下:

 

    待檢菌提取的核酸質(zhì)量應(yīng)能滿足核酸擴(kuò)增的要求。采用紫外分光光度法測定模板

DNA的濃度和純度,應(yīng)能夠滿足后續(xù)測試的要求,核酸濃度不宜低于10ng/μL,

A260/A280比值宜在1.8~2.0之間。

 

    在應(yīng)用紫外分光光度法做核酸質(zhì)量測定項目時,紫外分光光度計及附件配置要求如下:

1.常規(guī)紫外分光光度計

2.微量比色皿,容積一般在100μL左右,光程為10mm

3.核酸濃度梯度:1~5μmol/L5~25μg/m L,堿基對13個,雙鏈)

 

  • 儀器配置方案

    根據(jù)指導(dǎo)通則解析內(nèi)容,藥品生產(chǎn)企業(yè)可能會采購紫外分光光度計來應(yīng)對新版藥

典的實施,推薦以下配置方案:

  • 紫外可見分光光度計主機(jī)

?

  • 微量樣品池架

主要用途:配合微量比色皿使用,可以提高微量樣品的測量精度。

作用:微調(diào)樣品池位置,盡可能使測量光束大限度通過微量比色皿的通光孔,提高微量樣品的測量精度。

MH181-1 型微量樣品池架(適用于TU-18系列)

MH19-1 型微量池架(適用于TU-19系列)

  • 微量比色皿

石英側(cè)開孔微量比色皿

名稱

規(guī)格

光程(mm

容積(mL

石英側(cè)開孔微量池

MC02-5

5

0.020

石英側(cè)開孔微量池

MC03-5

5

0.030

石英側(cè)開孔微量池

MC05-5

5

0.050

石英側(cè)開孔微量池

MC08-5

5

0.080

石英側(cè)開孔微量池

MC04-10

10

0.040

石英側(cè)開孔微量池

MC06-10

10

0.060

石英側(cè)開孔微量池

MC10-10

10

0.100

石英側(cè)開孔微量池

MC16-10

10

0.160

 

石英單側(cè)壁微量池

名稱

規(guī)格

光程(mm

容積(mL

石英單側(cè)壁微量池

SM02-5

5

0.020

石英單側(cè)壁微量池

SM03-5

5

0.030

石英單側(cè)壁微量池

SM05-5

5

0.050

石英單側(cè)壁微量池

SM08-5

5

0.080

石英單側(cè)壁微量池

SM04-10

10

0.040

石英單側(cè)壁微量池

SM06-10

10

0.060

石英單側(cè)壁微量池

SM10-10

10

0.100

石英單側(cè)壁微量池

SM16-10

10

0.160

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